產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是專用于探針法實時熒光定量PCR 的預(yù)混體系。2×濃度,操作簡單方便;新一代的高效熱啟動酶,針對qPCR優(yōu)化的PCR buffer與增強劑,使本產(chǎn)品特異性強,靈敏度高,在寬廣的模板濃度范圍可以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量準(zhǔn)確,重復(fù)性好,可信度高。
無需添加ROX Reference Dye:Roche LightCycler系列, MJ Research Chromo4, MJ Research Opticon 2, Takara TP-800, Bio-Rad系列, Thermo Scientific Pikoreal 96,Qiagen Corbett Rotor-Gene系列, Mastercycler ep realplex
添加Dye ROX A(50×):Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6, ViiA 7; Stratagene MX4000, MX3005P, MX3000P.
添加Dye ROX B(50×):Applied Biosystems 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast, StepOne, StepOnePlus
三步法熒光定量PCR
步驟 | 溫度 | 時間 |
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預(yù)變性 | 95℃ | 30 s |
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變性 | 95℃ | 10 s | 35-40 個循環(huán) |
退火 | 56-64℃ 1) | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2) |
注意:
1)無法得到理想的擴增效率時,適當(dāng)降低退火溫度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時,提高退火溫度。
2)對于300bp以內(nèi)的片段,延伸時間30s即可,200bp以內(nèi)的片段,延伸時間20s即可。